耿劲松¹，倪衡建²，董建成¹，蒋葵¹，周爱玲³，胡亚娥³

1南通大学医学院医学信息学教研室，江苏省南通市 226001；2南通大学医学院人体解剖学教研室，江苏省南通市 226001；3南通大学医学院病理生理学教研室，江苏省南通市 226001

耿劲松、倪衡建、董建成为并列第一作者。

基金项目：江苏省自然科学基金资助项目（BK2004048）；南通市应用研究科技计划项目（K2008009）

摘要
背景：有研究表明复方中药脑益康的一些有效成分对减轻神经元损伤有益。
目的：观察脑益康对AD动物模型脑组织胆碱乙酰基转移酶（choline acetyltransferase , ChAT）及促凋亡蛋白3（caspase-3）表达的影响，探讨其可能的神经保护作用机制。
设计、时间和地点：随机对照动物实验，于2006-11/2007-12在南通大学病理生理学教研室完成。
材料：中药复方脑益康主要成分有制首乌、知母、石菖蒲等药物，由南通市中医院制剂室将其制成颗粒剂。鹅膏蕈氨酸（Ibotenic acid, IBO)购自美国Sigma-Aldrich。山羊抗ChAT单克隆抗体购自美国Chemicon公司，兔抗凋亡蛋白3单克隆抗体购自美国Cell Signaling公司。
方法：将60只雄性2月龄SD大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、脑益康低、中、高剂量组及脑复康组，每组10只。除假手术组外，均采用脑立体定位仪自双侧Meynert基底核注射5μgIBO建立AD模型，假手术组注射1μL的生理盐水。于造模后第2天，脑益康低、中、高剂量组给予1.73、3.45、6.90 g/kg的脑益康，脑复康组、模型组、假手术组分别给予0.04g/mL的脑复康、0.5%羧甲基纤维素钠和生理盐水。均灌胃给药，剂量为1mL/100g，1次/d。
主要观察指标：造模给药28d后，应用Western blot测定额叶皮质ChAT蛋白的含量，应用免疫组织化学法观察额叶皮质caspase-3阳性神经元的表达。
结果：与假手术组比较，模型组ChAT蛋白的表达明显降低，caspase-3的表达明显增加（P<0.01）。与模型组比较，给药各组ChAT蛋白的表达均明显增高（P<0.05-0.01），脑益康中、高剂量组caspase-3的表达明显降低（P<0.01），以脑益康中剂量组效果最明显。
结论：复方中药脑益康可增加额叶皮质ChAT蛋白表达，抑制额叶皮质caspase-3的表达，并可能以剂量依赖性形式发挥其神经保护作用。
关键词：阿尔茨海默病；脑益康；胆碱乙酰基转移酶；促凋亡蛋白-3