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3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺对原代培养海马神经元存活和凋亡的双重作用

 发布者:LiYZBS  发布时间:2009年12月23日 
 
来源:NRR

摘要
背景:3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺对海马有神经毒性作用已得到证实。然而不到致死量的3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺对海马还有神经保护作用。
目的:观察3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺对海马神经元活力、凋亡酶caspase-3活性及N-甲基-D-天(门)冬氨酸受体NR2B mRNA表达的影响。
设计:细胞学体外实验。
时间及地点:于2008年在Departments of Anatomy, faculty of medicine and Toxicology - Pharmacology, faculty of Pharmacy, Tehran University of Medical Sciences完成。
材料:PCR试剂购自加拿大Fermentase公司;Caspase-3 比色法检测试剂盒购自美国Sigma公司;Anthos2020酶标仪购自英国Biochrom公司。
方法:分离Wistar孕鼠妊娠18~19d胚胎海马神经元,原代培养后,用MTT法检测海马神经元活力。用100~5000 μmol/L的3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺作用于细胞,确定3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺半数致死量为1500μmol/L。以低于半数致死量的1500μmol/L 3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺进行其后实验。100,200,400,800,1050 μmol/L 3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺干预24h后,RT-PCR检测NR2B mRNA表达,比色法检测Caspase-3相对活性。
主要观察指标:原代培养的海马神经元活力,Caspase-3活性和NR2B mRNA表达。
结果:3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺诱导的海马神经元毒性具剂量依赖性,即高剂量1000~5000μmol/L 3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺降低了神经元活力,而低剂量500μmol/L 3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺则可增高神经元活力(P< 0.01)。低剂量200和400 μmol/L 3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺降低了caspase-3活性(P< 0.01);而高剂量800和1050 μmol/L3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺增高了caspase-3活性(P< 0.01)。100~1050 μmol/L的 3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺对海马神经元NR2B mRNA表达无明显影响。
结论:3,4-亚甲二氧甲基苯丙胺对海马神经元活力和caspase-3活性的影响具双重效应,但可能与N-甲基-D-天(门)冬氨酸受体无关。

 

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