李丽华^1,2*，屈艺^1*，张莉¹，李熙鸿¹，李晋辉¹，毛萌¹，金秀东³，母得志¹

1四川大学华西第二医院儿科，610041; 2中国人民解放军北京军区总医院附属八一儿童医院儿科，100007；3牡丹江医学院157011

摘要
背景：HIF1的靶基因中除有神经保护作用的基因外，尚有多种促凋亡基因，因此在缺氧缺血性脑损伤中，HIF1a的作用是对神经元保护还是促进神经元的凋亡？
目的：以发育期大鼠缺血和缺氧2种模型为实验对象，观察缺氧缺血性脑损伤时HIF-1α 与神经元凋亡间的关系，认识HIF-1α在神经元凋亡中的正负双向作用。
设计、时间及地点：随机、对照动物实验，实验于2006-05/2007-05在四川大学小儿神经实验室完成。
材料：细胞凋亡检测试剂盒购自美国Roche公司。兔抗小鼠HIF-1α多克隆抗体购自美国Santa Cruz Biotechnologies公司。兔抗小鼠CC3多克隆抗体购自美国Chemicon公司。
方法：将36只出生10d的发育期SD大鼠随机分为3组（n=12）：假手术组（对照组），缺氧组，缺血缺氧组。每组经缺氧处理后按时间不同3组(n=4)：4，8和24h组。缺氧缺血组永久结扎右侧颈总动脉，并缺氧 (8%O₂/92%N₂) 2.5h。缺氧组暴露右侧颈总动脉，但不结扎，只缺氧2.5h。对照组只暴露右侧颈总动脉，不结扎，也不做缺氧处理。
主要观察指标：大鼠组织病理损伤变化，HIF-1α和活化的caspase-3蛋白表达、阳性细胞的综合光密度（IOD）和凋亡阳性细胞数量。
结果：H&E染色结果显示缺氧缺血后24h，大脑皮质神经元明显变性、水肿。缺氧或缺氧缺血后4hHIF-1α表达明显增高，8h达高峰，24h下降, 且在缺氧缺血组和缺氧组的HIF-1α表达均较假手术组明显增高(P<0.01)。caspase-3在缺氧或缺氧缺血后4和8h即有增高，24h明显增加，而相比其他各组，假手术组caspase-3表达量最少 (P<0.01)。TUNEL染色显示在缺氧或缺血缺氧后，TUNEL染色阳性细胞表达量在相对应的组和时间点上，24h表达量最多 (P<0.05)。HIF-1阳性细胞表达在缺氧缺血后同一时间点相比，单纯缺氧组比缺氧缺血组增多 (P<0.05)，而活化的caspase-3蛋白表达及TUNEL阳性细胞数在单纯缺氧组比缺氧缺血组表达明显减少(P<0.05)。
结论：在发育期缺氧缺血性脑损伤时，HIF-1α可能对神经元损伤起保护作用。
关键词：缺氧诱导因子-1α，凋亡，缺氧，缺血，脑损伤