薛寿儒^，杨新新，董万利，惠国桢，郭礼和

国家973创伤项目（2005CB522604）和国家自然科学基金项目（项目批准号30271325）。

摘要
背景：人羊膜上皮细胞有分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的潜能，可分泌多种神经营养因子，有代谢多巴胺的酶系统，这些特性为它用来治疗帕金森病提供了理论基础。
目的：观察人羊膜上皮细胞移植于帕金森病模型鼠侧脑室的存活及分化情况，以及它对帕金森病模型鼠纹状体区多巴胺、高香草酸、3，4-二羟基苯乙酸，5羟基吲哚乙酸、5羟色胺，脑脊液中多巴胺和旋转行为的影响。
设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007-05/2008-12在中国科学院上海生命科学研究院细胞与生物化学研究所、和泓生物技术研究院完成。
材料：人羊膜上皮细胞取自上海国际和平妇幼保健院健康产妇剖宫产后弃置的胎盘羊膜。6-羟多巴胺、阿朴吗啡、小鼠抗人Vimentin单克隆抗体购自美国Sigma公司，小鼠抗人Nestin，TH单克隆抗体购自美国Chemicon公司。
方法：随机将健康成年SD大鼠114只分为纹状体立体定向注射2μL 6-羟多巴胺（3.5μg/μL）建立帕金森病模型的实验组90只和未造模的对照组24只。将造模成功的51只大鼠随机分成3组，17只/组：移植组，侧脑室注射10μL含1×10⁵/mL人羊膜上皮细胞的PBS悬液；PBS组，侧脑室注射10μL PBS；模型组不做任何处理。
主要观察指标：细胞移植后5周，应用免疫组化方法检测大鼠纹状体区TH阳性细胞的表达。移植后10周，免疫荧光方法观察侧脑室区移植的人羊膜上皮细胞的存活情况，免疫组化方法观察侧脑室和第三脑室区移植的人羊膜上皮细胞的分化情况，高效液相色谱-电化学仪测定纹状体多巴胺、高香草酸、3，4-二羟基苯乙酸、5羟基吲哚乙酸、5羟色胺以及脑脊液中多巴胺的含量。造模成功后1周腹腔注射阿朴吗啡（0.5mg/kg）观察各组大鼠旋转行为的变化，连续观察10周。
结果：与模型组和PBS组比较，移植组纹状体区TH阳性神经元数量明显增多（P＜0.01）, 大鼠旋转次数明显降低（P＜0.01）。与PBS组比较，移植组纹状体区单胺类神经递质含量明显增高（P＜0.05-0.01）,脑脊液中多巴胺含量明显增加（P＜0.01），同时，移植组大鼠的侧脑室和第三脑室可见大量nestin，vimentin，TH免疫阳性细胞。
结论：人羊膜上皮细胞侧脑室移植可存活10周以上而未见过度生长，并可分化为DA能神经元，促进DA能神经元分泌单胺类神经递质，改善帕金森病大鼠的旋转行为。
关键词：人羊膜上皮细胞； 帕金森病模型；侧脑室；细胞移植；多巴胺