叶冬青1，高维娟1△，闫凤霞1，钱涛2，张雅丽2

(1. 承德医学院病理生理学教研室，河北省承德市 067000)
(2. 承德医学院附属医院，河北省承德市 067000)

河北省自然科学基金资助项目(No.C2006000865)

[摘  要] 
背景：研究表明黄芪注射液可抑制全脑缺血再灌注大鼠海马神经元凋亡，并且对离体培养的缺氧缺糖／复氧复糖大鼠海马神经元凋亡有抑制作用。
目的：观察黄芪注射液对缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因c-Jun氨基末端激酶3(c-Jun N terminal kinase3，JNK3)mRNA表达的影响。
设计、时间和地点：细胞分子水平的随机对照实验，于2008-02/06在承德医学院中心实验室完成。
材料：黄芪注射液购自成都地奥九泓制药厂，主要成分为黄芪甲甙。JNK3mRNA探针、原位杂交试剂盒购自天津灏洋生物科技有限公司，JNK3 RT-PCR引物由上海生物工程有限公司合成。
方法：取新生1~2d SD大鼠海马神经元进行原代培养。对原代培养8d的大鼠海马神经元进行如下干预：缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪注射液组和溶媒对照组在无糖Earle’s液中及含有高纯度氮气的缺氧装置里培养30min再复氧复糖，建立缺氧缺糖/复氧复糖细胞模型。正常对照组正常培养。另外，黄芪注射液组和溶媒对照组分别于缺氧缺糖前2h加入含生药0.5 g/L的黄芪注射液或等量的无菌去离子水。
主要观察指标：于复氧复糖后0，0.5，2，6，24，72，120h采用原位杂交和RT-PCR方法检测海马神经元JNK3 mRNA的表达。
结果：正常对照组大鼠海马神经元形态正常；缺氧缺糖/复氧复糖组和溶媒对照组大鼠海马神经元出现明显的凋亡样病理改变；黄芪注射液组大鼠海马神经元凋亡样病理改变较轻。原位杂交和RT-PCR结果均显示，与正常对照组比较，缺氧缺糖/复氧复糖组和溶媒对照组海马神经元JNK3 mRNA的表达明显增多（P<0.05）；与缺氧缺糖/复氧复糖组和溶媒对照组比较，黄芪注射液组海马神经元JNK mRNA的表达明显减少（P<0.05）。
结论：黄芪注射液可抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡相关基因JNK3 mRNA表达，从而抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元的凋亡。


[关键词]  缺氧缺糖/复氧复糖；黄芪注射液；c-jun氨基末端激酶mRNA；海马神经元

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