尚晓玲1, 高颖2, 尹岭3, 张金涛3, 王硕仁2

1长春中医药大学基础医学院中医基础教研室, 吉林省长春市 130117 
2北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室, 北京市 100700
3解放军总医院神经信息中心, 北京市 100853
张金涛单位更为: 中国人民解放军第八十八医院神经内科，邮编：271000

国家自然科学基金项目 （30672692）

摘要:
背景：研究显示中药复方益肾达络饮能够减少实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis, EAE)时炎性介质的产生及减轻炎症反应对机体的损伤，改善神经功能。
目的:从神经病理学、分子生物学角度观察中药复方益肾达络饮对EAE大鼠的作用效果。
设计、时间和地点：随机分组对照动物实验，于2005/2006在北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室和解放军总医院神经信息中心完成。
材料：益肾达络饮饮片主要成分为熟地、鹿角胶、栀子、石菖蒲，购自北京中医药大学东直门医院药房，兔抗鼠β-淀粉样前体蛋白、p38多克隆抗体购自北京中衫金桥生物技术公司，干扰素γ、白细胞介素4 ELISA试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。
方法:健康雌性8～12周龄SJL/J小鼠72只，随机分为4组：正常组、模型组、激素组、中药组，每组18只。除正常组外，其余3组上腹部皮下注射0.2mL的抗原配剂（含PLP139-151 150μg，结核杆菌H37RA400μg)免疫小鼠,并于第1，3天静脉注射0.1 mL百日咳杆菌液(含0.6×106个百日咳杆菌)建立EAE小鼠模型。7d后，模型组、中药组、激素组分别灌胃给予0.2mL的生理盐水，益肾达络饮（2g/kg）及醋酸泼尼松（0.078mg/kg），1次/d，连续14d。正常组不做任何处理。
主要观察指标：采用HE染色，Luxol Fast Blue染色方法观察组织病理学改变。采用免疫组化方法检测各组小鼠中枢神经组织中β-淀粉样前体蛋白、p38蛋白表达。ELISA方法检测中枢神经组织中干扰素γ、白细胞介素4含量，采用神经功能评分法评估小鼠的行为学改变。
结果: 与模型组比较，中药组和激素组中枢神经系统炎性细胞浸润相对较少，神经纤维断裂、脱髓鞘改变较轻；中枢神经组织β-淀粉样前体蛋白，p38蛋白表达明显下降（P<0.05或P<0.01），以中药组作用更明显。同时，中药组和激素组小鼠体质量下降不如模型组明显，神经功能评分较模型组低（P＜0.05或P＜0.01）；与模型组比较，激素组与中药组中枢神经组织干扰素γ含量明显降低（P＜0.01），白细胞介素4含量明显升高（P＜0.01）。
结论：益肾达络饮可能通过下调β-淀粉样前体蛋白表达、抑制轴突变性、减轻炎症反应来改善EAE小鼠的神经功能。其抗炎机制可能是通过抑制p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路实现的。

关键词: 自身免疫性脑脊髓炎;  多发性硬化;  益肾达络饮;  β-淀粉样前体蛋白

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