1 Department of Histology and Embryology, Medical School of Nantong University, Nantong  226001, Jiangsu Province, China
2 Jiangsu Province Key Laboratory of Neuroregeneration, Nantong  226001, Jiangsu Province, China
Xiaoli Sun, Studying for master’s degree, Department of Histology and Embryology, Medical School of Nantong University, Jiangsu Province Key Laboratory of Neuroregeneration, Nantong  226001, Jiangsu Province, China    zymsxl@126.com

Correspondence author: Xiaodong Wang, Master, Professor, Department of Histology and Embryology, Medical School of Nantong University, Jiangsu Province Key Laboratory of Neuroregeneration, Nantong, 226001, Jiangsu, People’s Republic of China

Supported by grant from Natural Science Foundation of China, No. 30870643 and Jiangsu Province Natural Science Foundation, No. BK2002036

背景：已报道无血清条件下联合应用bFGF、PDGF、HRG、RA、Forskolin对大鼠骨髓基质细胞诱导分化为成髓鞘细胞（施万细胞样细胞），而神经干细胞在这组细胞因子诱导下会如何分化？
目的：研究神经干细胞在这组细胞因子诱导下的分化。
设计、时间及地点：细胞生物学实验，于2005-08/2007-01在南通大学组织学与胚胎学教研室和江苏省神经再生重点实验室完成。
材料：30只健康的SD大鼠14－16天胚胎， PDGF购自R&D (Minneapolis, MN). 兔抗大鼠TH IgG 购自Chemicon (Temecula, CA). B27和FBSMQC购自Gibco-BRL (Gaithersburg, MD). bFGF、HRG和RA、Forskolin、多聚赖氨酸、小鼠抗大鼠S－100 IgG抗体、兔抗大鼠MAP2 IgG抗体、小鼠抗大鼠nestin IgG抗体、FITC标记的羊抗兔IgG抗体、TRITC标记的羊抗小鼠IgG抗体、Hoechst33342 均购于Sigma (St. Louis, MO)。
方法：大鼠神经干细胞分别用无血清的一步法（bFGF、PDGF、HRG、RA、Forskolin联合作用）、或二步法（先RA作用72小时，然后bFGF、PDGF、HRG和Forskolin再作用）、对照组为10%血清单独或20ng/mlbFGF单独作用。
主要观察指标：细胞分化的情况使用MAP2和S－100的免疫细胞化学技术进行鉴定，图像分析方法定量了解分化细胞的形态参数，全细胞膜片钳技术了解分化的细胞Na+通道情况。
结果:MAP2阳性的细胞在联合细胞因子组明显高于血清单独或bFGF单独的组，图像分析系统测量MAP2阳性细胞的参数（细胞面积、细胞周长和最长的细胞突起）在联合细胞因子组也明显高于血清单独或bFGF单独的组，这些细胞的电生理特性表明一步法好于二步法。
结论：结果提示一步法是有效的促进神经干细胞向神经元分化的方法。

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