杨立彬1，李树蕾2，谭岩3，许淑芬3，段秀梅3，方艳秋3，刘立华3，车媛媛3，刘磊3，周立威3

1吉林大学第一医院儿科；2吉林大学白求恩医学院组织学与胚胎学教研室；3吉林大学第一医院中心实验室，吉林省长春市 130021

吉林省卫生厅重点实验室项目资助课题(2006079)；全国第四十届博士后科学基金资助课题(20060400893)
摘要
背景：人肿瘤坏死因子样分子1A（TL1A）是Th1细胞的强共刺激因子，而GBS(吉兰-巴雷综合征)是Th1细胞介导的神经系统自身免疫病。
目的：探讨急性期吉兰-巴雷综合征患儿外周血T淋巴细胞中hTL1A的表达情况，以及hTL1A对IFN-γ分泌的影响。
设计、时间和地点：神经免疫学随机对照体外实验，于2005-11/2007-11在吉林大学第一医院中心实验室完成。
材料：实验用静脉血样取自6名6~12岁的血常规检查各项指标正常健康捐献者和发病后1周内，尚未给与激素和免疫球蛋白治疗6名6~12岁急性期吉兰-巴雷综合征患儿提供。1mg/mL纯化rhsTL1A （相对分子质量22000，带有6×His标签，可溶形式)由吉林大学第一医院中心实验室提供。
方法：标准Ficoll梯度离心法分离健康捐赠者外周血单个核细胞（PBMCs）接种于96孔板，设2μg/mL 植物血凝素（对照组），2μg/mL 植物血凝素混合25，100，400 ng/mL rhsTL1A组，3H-TdR掺入法检测T细胞增殖。ELISA法检测急性期吉兰-巴雷综合征患儿血清中IFN-γ水平。流式细胞术检测急性期吉兰-巴雷综合征患儿外周血中hTL1A阳性细胞占CD3+ T细胞的百分比。急性期吉兰-巴雷综合征患儿外周血单个核细胞经2μg/mL 植物血凝素体外活化后，给予外源性400ng/mL rhsTL1A，ELISA法检测外周血单个核细胞分泌的IFN-γ水平。
主要观察指标：rhsTL1A促T细胞增殖的刺激指数SI；急性期吉兰-巴雷综合征患儿血清中IFN-γ的含量；hTL1A阳性细胞占CD3+ T细胞的百分比； rhsTL1A刺激急性期吉兰-巴雷综合征患儿外周血单个核细胞分泌IFN-γ水平。
结果：T细胞增殖实验显示各组刺激指数（SI）均较对照组升高，其中400ng/mL rhsTL1A组的刺激指数最大。急性期吉兰-巴雷综合征患儿血清IFN-γ水平较对照组显著升高（P <0.05）。急性期吉兰-巴雷综合征患儿外周血中hTL1A+ CD3+T细胞占CD3+T细胞的百分比较健康对照组显著增高（P<0.01）。急性期吉兰-巴雷综合征组外周血单个核细胞经植物血凝素活化后对400ng/mL rhsTL1A的反应性更高，分泌的IFN-γ水平均显著升高（P <0.05）。
结论： 400ng/mL rhsTL1A有效促进2μg/mL 植物血凝素活化的T细胞增殖。急性期吉兰-巴雷综合征患儿外周血中活化T细胞表达hTL1A增加，促进IFN-γ的分泌。参与吉兰-巴雷综合征中炎性细胞因子分泌的病理过程。

[关键词]  肿瘤坏死因子样分子1A；细胞增殖；吉兰-巴雷综合征；IFN-γ

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